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储存：常温运输（勿超过30℃）， 2-8℃储存，有效期1年。 一、产品描述 5-Bromo-4-Chloro-3-Indolyl Phosphate (5-溴-4-氯-3-吲哚基-磷酸盐), BCIP/NBT （四唑硝 基蓝）是碱性磷酸酶底物, 产物为深蓝色, 在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP被水解, 水解产 物与NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。 本品为即用型，直接使用，通常用于标记物为碱性磷酸酶的WB, 显色稳定，本底低， 也可用于标记物为碱性磷酸酶（AP）的免疫组化染色。 二、使用方法 1. 膜或组织切片在最后一次洗涤完毕后，加入适量BCIP/NBT染色工作液。 2. 室温避光孵育5-30分钟或更长时间（可长达24小时），直至显色至预期深度。 3. 用蒸馏水洗涤1-2次即可终止显色反应。 4. 膜标本可干燥后避光保存；组织切片或细胞样品，显色反应终止后，可以用中性红复染。 三、问题及解决办法 1. 背景过高 a. 加一抗之前封闭，用与二抗动物种类相同的动物血清(10% v/v) 一般可得到很好的 结果。其它封闭剂包括 10% BSA, 0.05% TWEEN-20, or 3% 脱脂奶粉。当用生物素 -亲合素系统时不要用奶封闭 b. 减少染色时间 c. 选择合适的结合物浓度
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