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一、产品描述 HAT选择性培养基,是次黄嘌呤(Hypoxantin, H)、氨基蝶呤(Aminopterin, A)和胸腺嘧啶脱氧核苷 (Thymidin, T)三种物质的细胞培养基,是常用的骨髓杂交瘤细胞补充性性培养基,用于筛选出B 细胞和 HGPRT 缺陷型瘤细胞(HGPRT-)正确融合后的杂交瘤。 HAT中的氨基蝶呤(Aminopterin, A)通过抑制二氢叶酸还原酶3来阻断DNA的合成,这种HGPRT酶缺 陷的瘤细胞,也不能利用补救途径合成核酸而被淘汰。而具有具有次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HPRTase) 和胸苷激酶(TK)酶的B细胞,如果提供次黄嘌呤(Hypoxantin, H)和胸苷(Thymidin, T),则可以利用补救 途径合成核酸。 B 细胞或者B 细胞自身融合后,因不能无限增殖,随着细胞传代会逐步淘汰。最终,只有 B 细胞和瘤细胞的融合细胞能利用旁路合成而得以存活。 二、产品用途 本产品是含有次黄嘌呤(H)、氨基蝶呤(A)、胸苷(T)和甘氨酸的混合物,适用于杂交瘤筛选和细 胞培养应用。 三、使用方法 HAT选择性培养基为无菌液体,以50×的浓缩溶液供应,使用前应稀释至1×。将1体积的HAT选择性培 养基(50×)稀释到49体积所需的细胞培养基中。 备注:若本品在室温解冻后有成分过饱和析出,可在37°C水浴中重新溶解,摇匀后取溶液使用。
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