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tween-20在WB的作用时间：2024-03-15 Western blot 实验中经常使用 TBST 洗膜和稀释抗体。是由TBS添加Tween 20经HCl调节pH至7.4后配制而成。Tween-20是一种黄色或琥珀色的透明油状液体，有特殊的气味和轻微的苦味。Tween-20 在 Western blot 中起到了什么作用呢？ Tween-20 ，中文名为吐温-20或吐温20。为非离子型表面活性剂，在 Western blot 实验里的作用原理如下： 抗体稀释液中，它可以通过降低溶液表面张力，使抗体更容易扩散并结合到膜上的目标蛋白，同时减少非特异性结合，从而提高检测的特异性和信噪比。 在WB洗液里的吐温是和BSA一样，对抗原抗体蛋白提供保护作用，同时因为是表面活性剂可以减少抗体对蛋白和PVDF膜的非特异性作用，用于洗脱未结合的抗体、减少非特异性结合。 如果非特异条带较多，可以在Wash Buffer中添加终浓度1%的Tween-20配合少时多次洗涤改善实验结果，另外还可以降低抗体稀释度、降低上样量。 虽然 WB 是很基础实验，但是基础并不代表简单。翻车的主要原因在于 WB 的步骤实在繁琐：从样本制备开始，到蛋白电泳、蛋白转膜、抗体孵育，一整套流程下来花费 1～2 天的时间才能进行最后的显影（用预制胶有转膜仪和加速器的土豪们也可以半天出结果）。这些环节中但凡有一个出错，就会导致实验的失败。 上一篇丽春红染色下一篇手把手教你用trizol提取总RNA |
